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    PCR在臨床中的應(yīng)用(二)

    發(fā)布時間: 2009-07-30  點擊次數(shù): 3404次


    1、檢測甲型病毒性肝炎

     HAV為甲型病毒性肝炎的病原體。甲型肝炎病毒為嗜肝RNA病毒???HAV IgM和抗-HAV IgG等抗體成分為其血清標志物。[臨床意義]  血液中抗-HAV IgM型抗體在發(fā)病后1~2周內(nèi)出現(xiàn),3個月后滴度下降,6個月后不易檢出, 該抗體陽性,即可診斷為急性甲型肝炎???HAV IgG出現(xiàn)較抗-HAV IgM稍晚,一般終身存在,是一種保護性抗體,可用于甲肝的流行病學(xué)調(diào)查。

     2、檢測戊型肝炎病毒

    是一種RNA病毒。臨床診斷HEV的血清標志物為抗- HEV IgM 和抗- HEV IgG。 健康人檢查結(jié)果均為陰性。 抗- HEV IgM 陽性反應(yīng),可診斷急性戊肝,持續(xù)時間2~3個月?;謴?fù)期患者血清中可檢出抗- HEV IgG,持續(xù)時間約1年。

     3、檢測丁型肝炎病毒

    是一種RNA病毒。臨床診斷HDV的血清標志物為HDV Ag、抗- HDV IgM 和抗- HDV IgG 等三種。 健康人檢查結(jié)果均為陰性。  H DV感染時,HDV Ag陽性??? HDV IgM 陽性,見于急性HDV感染??? HDV  IgG陽性,是診斷慢性丁肝的可靠血清學(xué)指標。

     4、尖銳濕疣患者外周血中HPVDNA的檢測

    尖銳濕疣(CA)病情頑固,極易復(fù)發(fā)。過去的研究一直認為HPV是嚴格的親上皮病毒。但有人研究發(fā)現(xiàn)血液中能檢出HPVDNA。中國醫(yī)科大學(xué)附屬*醫(yī)院皮膚科的研究人員推測尖銳濕疣在HPV感染的病程中可能存在病毒血癥,可能是易感部位CA復(fù)發(fā)或其他部位出現(xiàn)CA病變的病毒來源。為此研究人員對30例CA患者外周血中HPVDNA進行了檢測。方法:采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測30例CA患者皮損和外周血中的HPVDNA,20例正常人外周血作對照。采用限制性內(nèi)切酶RsaⅠ、PstⅠ對HPV做分型鑒定。選取1例皮損與外周血均為陽性的PCR產(chǎn)物進行測序。結(jié)果:30例CA患者皮損均檢出HPVDNA,血漿中未檢測到HPVDNA,有8例外周血單一核細胞(PBMC)中檢測到HPVDNA(陽性率為26.7%),20例正常人對照為陰性。兩組陽性率經(jīng)χ2校正檢驗χ2=4.52,P<0.05,差異有顯著性。酶切和測序結(jié)果顯示,PBMC中的HPV型別與其皮損處的型別有一致性。結(jié)論:CA患者在HPV感染的病程中可能存在病毒血癥,這可能是CA易于復(fù)發(fā)的原因之一。本研究結(jié)果提示,病毒在局部大量繁殖有可能破壞局部基底膜帶,通過血管入血。此外,在PBMC中檢測到HPV提示,該病可能有性傳播以外的途徑經(jīng)血行傳播的可能。

    5、評價熒光定量PCR(QPCR)技術(shù)對不孕癥婦女宮頸沙眼衣原體和解脲支原體檢測意義.

    方法:用QPCR技術(shù)對60例不孕癥患者(不孕組)及78例正常生育者(對照組)行宮頸沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)檢測.結(jié)果:不孕組宮頸分泌物CTDNA、UUDNA及混合感染陽性檢出率明顯高于對照組(P<0.05=.結(jié)論:QPCR對不孕癥患者宮頸CTDNA、UUDNA的檢測特意性強、快速、靈敏,臨床應(yīng)用價值高. 
     
     6、快速診斷將宮頸粘膜、皮膚、口腔、角膜等組織細胞涂片后,用特異性抗體作間接免疫熒光或免疫組化染色法檢測病毒抗原;Wright-Giemsa染色鏡檢,如發(fā)現(xiàn)核內(nèi)包涵體及多核巨細胞,可考慮HSV感染;將皰疹皰液進行電鏡負染可迅速確診。原位核酸雜交和PCR法可用于檢測HSVDNA。PCR產(chǎn)物的特異性鑒定選用Southernblot法,腦脊液PCR擴增被認為是診斷皰疹性腦炎的*手段。此外,DNA酶切圖譜也可作HSV鑒定和型別分析。HSV抗體測定對臨床診斷意義不大,僅用于流行病學(xué)調(diào)查



    附前一篇:

    PCR在臨床中的運用(一)

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